色谱分析法是一种广泛应用于化学及生化工程领域的分离方法,高度选择性的工艺可以分离出物理化学性质极为相似的成分,这在工艺过程及过程分析中很重要。
BE2系统是一种工业上非常重要的色谱法,即低压液相色谱法,其中包括离子交换法、尺寸排斥法、疏水相互作用法和亲和层析法。每种类型都使用不同的分离方法,分别是:粒子电荷、粒子大小和形状、分子疏水性和生物特异性。BE2包括详细的尺寸排斥色谱实验程序,特别是在分离蛋白质和染料方面。同时也可以用于研究其他类型的低压液相色谱。
尺寸排斥色谱法使用多孔球体来分离不同尺寸的颗粒,球体上小孔的粒径范围决定了颗粒是全部排阻还是部分排阻或是完全进入球体,完全排阻的颗粒在色谱柱体中的停留时间最短,完全进入球体中的颗粒在柱体中停留时间最长。部分排阻的颗粒停留时间介入二者之间。通过这种方法,不同粒径的颗粒即被分离。
指导功能
➤理解液相色谱法的原理及练习,包括如下内容:
色谱柱填料
样本应用
色谱柱层析
分析及成分收集器
➤理解影响分离的因素
➤理解通过紫外分光光度法测量蛋白质浓度的方法
详细功能
详细的教学练习包括向学生演示大小排除(凝胶过滤)色谱法的重要方面。提供的信息包括合适的凝胶基质、缓冲液、蛋白质等细节和深入的实验协议。虽然实验仅涉及尺寸排斥色谱法,但该系统适用于离子交换、亲和作用和疏水作用等其他低压液相色谱系统。该系统包括一个用于在线测量蛋白质浓度的紫外流动单元。检测水平为0.1 mg/ml的蛋白(牛血清白蛋白)。
➤了解低压液相色谱系统的操作规程
➤使用染料进行尺寸排斥色谱的可视化演示
➤确定流速和色谱柱长度对产品分离和浓缩的影响
➤根据蛋白质分子量校准色谱柱,并测定未知蛋白质的分子量
描述
BE2由一个台式装置组成,在其上安装两个长250毫米、直径10毫米的硼硅酸盐玻璃色谱柱。两者都配有可调的端部件,以允许不同的床高进行调查。在每个柱的顶部都有隔膜注射器,允许将样品引入柱表面。该柱是由一个3通道蠕动泵8辊设计,以提供平稳的流量。该泵具有变速驱动和广泛的管孔可以使用,从而提供一个非常广泛的流量范围。开关阀允许操作者轻松地选择所需的操作列。在塔的入口之前安装一个气泡捕集器,以防止空气进入。从该柱的出口通过到紫外光学流动单元,用于在线测量样品洗脱。流出流动单元的液体既可以引导流出,也可以使用成分收集器收集。成分收集器是定时器控制的,它可以容纳48根3毫升的试管。
为了保护色谱柱,必须对所有引入色谱柱的缓冲液和样品进行过滤和脱气。所需设备为标准实验室设备,但如果需要,也可以选择BE2 -1。BE2-1由滤膜架、保温瓶、真空泵和滤膜组成。样品过滤系统由注射器和一次性膜过滤器组成。样品注射器和针头也包括在内。
液相色谱所需要的方法确实需要一些实践,以达到可重复的结果。因此,对于没有这方面经验的用户,建议提供培训。
可选附件
BE2-1:缓冲过滤除气系统由滤膜架、保温瓶、水真空泵和滤膜组成。样品过滤系统由注射器和一次性膜过滤器组成。样本注射器和针头。
必要配件
软件要求配备计算机(不提供),需安装Windows98,2000,XP及以上的系统,并带有USB接口。
化学药品
提供的化学品有:尺寸排除凝胶(Sephadex G-100)、蓝葡聚糖和酚红。实验中使用的蛋白质和维生素B12不供应,但可以从化学供应商获得。
设备需求
单相电
BE2-A 220/240V/1ph/50Hz 10A
BE2-B 120V/1ph/60Hz 15A
BE2-G 220V/1ph/60Hz 10A
总尺寸
高:0.70m
宽:1.10m
深:0.50m
装运规格
体积:0.44m³
总重:36kg
辅助设备
BE1:间歇式酶反应器
CEU:催化反应器
UOP12:过滤装置
W8:厌氧消化池
W11:好氧消化池